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應用鱟試驗法檢測藥物的內毒素含量

發布時間: 2022-08-16  點擊次數: 1189次

藥物作為終產物進行內毒素LT法檢測是極為適宜的。

 

美國FDA已將LT法作為法定的藥物內毒素的檢測方法。檢測時,應用的試劑其敏感性不得低于0.2EU/mL。并應考慮藥物中內毒素的耐受限-量Tolerance limit其值等于每mg或每ml產物中內毒素的允許量)

 

如果一種藥品未曾通過LT法(鱟試驗法,Limulus test),但卻通過了RT法(家兔熱原試驗,Rabbit pyrogen test),則這種藥物亦不能出廠,除非此種RT法由官-方進行。有一些藥物,特別是已知有抑制或增強LT反應的藥物必須作抑制/增強試驗。

 

應用LT法檢測抗生素中內毒素的含量是很適宜的。大多數常用的抗生素如林可霉素、氯霉素、慶大霉素、雙氫鏈霉素、乳酸鹽紅霉素等并不抑制LT反應,故可直接進行測定。但亦有一些抗生素溶液能抑制LT反應,故必須進行抑制試驗。可用足量的無熱原水進行稀釋,直至用該抗生素不能抑制LT凝膠作用的最高濃度進行試驗,所以采用的試劑的敏感度必須等于或超過藥典規定的熱原試驗的敏感度。

 

 

這些能抑制LT反應的藥物中最典型的是青霉素類藥物,其抑制機理目前尚不清楚。有人認為青霉素的抑制作用是因其對細菌細胞壁所含的酶起作用之故另有人認為青霉素對LT凝膠形成的抑制作用與它們的血清蛋白結合率有顯著的相關、p<0.01。如BRL1071青霉素的血清蛋白結合率最高,它對LT反應的抑制作用亦最-強1.5mmol即能起抑制作用。鹽酸四環素對LT反應亦有抑制作用其抑制機理是由于抗生素溶液pH過低(≈4)的緣故。

 

LT法測定抗生素中內毒素含量比RT法敏感10100倍。

 

腫瘤化學療劑的副反應較多,有些與應用內毒素后相似。因此其不良反應可能是由于內毒素的污染所致。左旋門冬酰胺酶是由大腸桿菌或歐氏(Erwinia)植病桿菌制備的,由大腸桿菌制備的門冬酰胺酶每1000單位含內毒素超過1ng由歐氏桿菌制備的酶中亦發現有微量的內毒素。另外,博萊霉素,柔紅霉素、長春新堿等藥品,亦有少量的內毒素存在,--般為0.15ng/ m1。因此,必須對抗腫瘤半成品、成品及加工過程進行內毒素的檢測,使藥物中的內毒素含量控制在安全水平以下,以減少不良反應。

 

有些抗腫瘤藥有細胞毒性不宜采用RT法,因此LT法用于抗腫瘤藥物中內毒素的檢測是可行和適宜的。試管法仍為最-實用的方法。

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